产品介绍
His/GST Protein Pull Down Kit是体外检测蛋白质之间直接互作的有效方法，通过将带有His标签/GST标签的“诱饵蛋白”固定在固相基质上，从细胞裂解液等混合样品中，捕获有互作关系的“靶蛋白”，是伯仪互作系列产品的新成员。

常见问题解答

问：产品说明书中标注的规格，是填料含量还是总体积？
答：填料跟保护液的体积比各占50%。填料是在保护液里的，保护液和填料的比例是1：1，说明书中标注的，以5T为例，写的是0.15ml，这个0.15是填料的体积，但实际到手的是0.3ml的试剂。

问：试剂盒中的4FF试剂，用了两三次，就吸不上来了，没法摇匀的原因？
答：填料被吸干了，可能在用之前没有进行混匀，可以加适量填料保护液（PBS+20%乙醇。） 静置一晚上观察填料占总溶液的百分比，根据填料体积和保护液体积比为1:1加入适量的体积的填料。

问：表达的蛋白裂解完，可以直接用上清去做pull down吗？
答：是的，可以不做纯化，去做pull down的。

问：阴性对照怎么设置？
答：填料+与目的蛋白不结合的诱饵蛋白+目的蛋白。

注意事项
1.磁珠填料应保存在储存溶液中，防止干燥，使用前请充分混匀。
2.如果需要在还原条件下洗脱，向 1× 电泳上样缓冲液中加入DTT(终浓度 10-20mM)。
3.经煮沸后的填料失去结合能力，经煮沸的填料不应再次使用。
4.为保证最佳的实验结果，请选择较纯的诱饵蛋白进行蛋白互作。
5.对于蛋白互作实验，不同类的诱饵蛋白与靶蛋白结合的亲和性是有区别的，因此若本试剂盒提供的缓冲体系不能获得很好的实验结果，可自行优化缓冲液进行实验。
6.实验设计时，建议加入对照组，以备后续实验结果分析。
7.在确定实验结果前，建议保留各步骤的样品以备验证（如 input、流穿、洗杂、洗脱、煮球）。
8.配套的 Pull-down Column Accessory 附有两个规格的垫片，当使用微量介质（10-50μl）进行实验时，请按图一装入垫片，当使用大量介质（＞100μl）进行实验时，请按图二装入垫片。