产品介绍
Magneti-Q标签蛋白纯化试剂盒主要用于标签融合蛋白的纯化，它将抗体偶联在Beads上，这样可以把带有对应标签的融合蛋白结合到Beads上。经过缓冲液去除杂蛋白等步骤之后，再使用试剂盒中低 pH、高盐、多肽竞争、去垢剂或者变性剂等洗脱液从将融合蛋白从偶联Beads上洗脱下来，从而达到快速纯化蛋白的目的。

目前已有 Anti-His-tag、Anti-Myc-tag、Anti-HA-tag、Anti-DYKDDDDK-tag 四种标签蛋白纯化试剂盒，可以用来一步法纯化His标签、Myc标签、HA标签和DYKDDDDK标签蛋白的纯化。


常见问题解答

1、1×DYKDDDDK和3×DYKDDDDK的区别？
说明书中展示的数据均用3×DYKDDDDK（MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK）进行实验，但是我们后续发货的ElutionB是1×DYKDDDDK多肽，我们进行了相关实验，结果表明1×DYKDDDDK并不会影响洗脱效率，而且在SDS-PAGE电泳上也不会有条带，另外成本也会降低，更适合下游实验。

2、聚合物磁珠和琼脂糖磁珠有何区别和使用场景？
① 琼脂糖磁珠是带孔微球，粒径在 30-100 μm，交联时很大一部分配体会进入球孔内部，所以偶联载量相对较高，非常适用蛋白的纯化；而聚合物磁珠通常粒径为 1-3 μm 以下，配体主要分布在微球表面，这种类型的磁珠能够快速结合蛋白，空间位阻影响小，非常适合于蛋白互作实验，但其载量不高；
② Magneti-Q系列的磁珠是可以做IP的，但是我们更推荐使用琼脂糖磁珠进行蛋白纯化实验；使用聚合物磁珠进行蛋白互作实验如 IP、Co-IP 和 pull down 实验等。

3、为何纯化不到目的蛋白？
①可能是由于蛋白表达量低造成的，建议在纯化前用WB或者SDS-PAGE检测下蛋白原始表达量，如果WB信号很弱或者无信号，目的蛋白很难纯化到；
②可能由于洗脱方式不正确造成，建议根据自己的实验目的以及参考说明书中表2进行洗脱，如果多肽竞争洗脱（Elution Buffer B）检测不到目的蛋白可以尝试Elution Buffer C进行洗脱；
③样本中有高浓度的还原剂等干扰物质，建议用合适的裂解液。

4、 为什么不建议高温加热磁珠？
①本产品由生物素化抗体与SA琼脂糖磁珠偶联制备而成，如果直接煮球会造成Sa、抗体失活脱落，在SDS-PAGE胶上出现很多条带，从而影响目的条带的判断；
②为了解决煮球的问题，我们推荐Elution Buffer D缓冲液，这个缓冲液会导致少量配体的脱落，但不会影响后续结果的判断，适用于考马斯亮蓝或者WB检测。

5、抗体填料载量多少？
对于抗体填料载量的问题需要从摩尔比角度出发，一个抗体能结合两个抗原（这里排除抗体的多聚化和高聚化），摩尔比是1：2，摩尔数和蛋白的分子量以及浓度有关系，抗体160KDa，磁珠上偶联了10mg抗原，假设这10mg抗体都是有活性的，那对于一个20KDa的蛋白来说，在摩尔比是1：2的情况下，应该能够结合2.5mg。那如果是一个160KDa的蛋白，那应该能够结合20mg。也就是说这个载量和蛋白的大小有关系。

6、抗体是否可以再生？
这个系列的抗体可以用RG Buffer再生，再生后会导致载量有所下降，再生3-5次后配体脱落增加，且载量会下降30-50%，并且每次再生后该磁珠只能对同种蛋白进行纯化，否则有交叉污染的可能。

7、 我们试剂盒的优势有哪些？
①最大的优势是我们载量非常高，偶联10mg/ml抗体可保证每个抗体都有活性，和市场同类产品相比具有更好的结合抗原的能力；
②磁珠体系本身的优势就在于快速、方便以及可以自动化；
③本试剂盒提供多种洗脱缓冲液，可满足不同客户的需求；
④本系列产品提供带有多标签的红色荧光蛋白做为阳性对照，该蛋白带有His、Flag、Myc和HA标签，参考说明书中的使用方法可验证本产品的使用效果。

注意事项
1、本产品保存在 2-8℃冰箱中，不要冻结保存；
2、本产品出现轻微团聚属正常现象，可正常使用；
3、不要使用含有 DTT 等还原剂的细胞裂解液样品，DTT 可能会导致抗体配体的脱落；
4、本产品能耐受≤2M 尿素，高浓度的尿素会导致抗体配体脱落；
5、在清洗和洗脱时避免吸取到磁珠，清洗时吸取到磁珠会影响最终的载量，洗脱时吸取到磁珠会影响目的蛋白的质量和电泳效果，第一次洗脱后可以将洗脱液置于新的离心管中，再次置于磁力架上进行吸附；
6、本产品不能够直接高温加热磁珠，高温加热磁珠将造成抗体大量脱落，后进行电泳条带较多，影响对实验结果的判断。