01 产品优势FuturePAGE™蛋白预制胶采用全自动凝胶灌注技术,产品的重复性好,质量稳定。独特的凝胶缓冲配方使蛋白电泳条带更为清晰锐利,更加均匀,分辨率更高。
02 常见问题解答
在WB实验过程中,部分同学不可避免会碰到一些“拦路虎”。
本期,小编汇总过往经验,以助大家顺利完成实验。
问:FuturePAGE™蛋白预制胶尺寸、厚度?
答:胶板约10×8 cm,厚4. 5 mm;胶体约8.5×7 cm,厚1 mm。(测量存在一定误差)
问:FuturePAGE™蛋白预制胶适用电泳槽?
答:天能、伯乐、六一、WIX 。
问:FuturePAGE™蛋白预制胶每个胶孔的最大上样量是多少?
答:11孔胶最大上样量50 μL,15孔胶最大上样量30 μL。
问:FuturePAGE™蛋白预制胶跑胶参数?
答:160 V,45-50 min。电压不超过180 V。
问:FuturePAGE™蛋白预制胶的体系是什么,用什么电泳液?
答:预制胶为Bis-tris体系,目前使用Mops电泳液。Mops电泳液配方:50 mM Tris,5 0mM Mops,0.1% SDS,1mM EDTA,pH7.8。详细操作可见说明书。
03 问题条带解答1.电泳条带跑不下去,指示剂在加样孔内不动
可能原因:底部蓝色胶条没撕 解决办法:撕掉胶板底部蓝色胶条
2.指示剂偏斜
可能原因:电泳槽漏液 解决办法:调整胶板位置,检查密封条
3.电泳下端条带发黄
可能原因:
①电泳液从变形、损坏的胶板渗入 解决办法:选用合适的电泳槽,确认胶板是否损坏
②外槽电泳液太少,卡在临界点 解决办法:补齐电泳液
③电泳液pH值下降 解决办法:用去离子水重新配置电泳液
4.蛋白条带拖尾
可能原因:样品溶解不佳或者降解 解决办法:(1)样品加热,离心取上清(2)制备新鲜样品
5.指示剂呈倒三角状,即两边低、中间高,形成峰顶
可能原因:内、外槽电泳液量不够 解决办法:补满内槽电泳液,外槽电泳液补至2/3高度
6.指示剂出现弧度
可能原因:底部出口被电泳槽上胶条部分覆盖或者胶板底部没卡紧 解决办法:调整胶板位置,避免底部出口和胶条重合
7.指示剂条带异常是什么原因导致
可能原因:使用错误的电泳液 解决办法:使用MOPS-SDS Running Buffer
以上就是预制胶使用过程中常见问题及解决方法,如您遇到相同问题,可以按照对应的解决方法进行调整。如在使用过程中,遇到了其他问题,也欢迎您提出宝贵意见,我们将为您提供更加优质的服务。